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CRM006 阪崎肠杆菌显色培养基
(Chromogenic Enterbacter Sakazakii Agar)
用 途：
供婴儿奶粉以及其它食品中阪崎肠杆菌的鉴定和计数。（GB4789.40-2010和SN/T 1632-2005，ISO标准）
原 理：
蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；胆盐抑制革兰氏阳性菌，氯化钠可维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生；显色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷与阪崎肠杆菌中的α-葡萄糖苷酶发生反应，水解底物，释放出5-溴-4-氯-3-吲哚基显色基团，在淡黄色平板上产生绿-蓝绿色的菌落。
阪崎肠杆菌显色培养基 配方（每升）：
蛋白胨 11g
牛肉膏粉 5g
氯化钠 5g
柠檬酸铁铵 1g
硫代硫酸钠 1g
胆盐 1.5g
5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷 0.1g
琼脂 15g
终pH 7.3±0.2
使用方法:
1. 取瓶内阪崎肠杆菌显色培养基干粉39.6克，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min；冷却至50℃，摇匀倒平板。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光，4℃)。
2. 取样品333克按MPN三管法分别取100克、10克和1克分装在各三个2000ml、250ml和100ml的三角瓶中，在三角瓶中已装有经45℃预热的9/10(样品为1/10)的无菌蒸馏水或缓冲蛋白胨水，摇匀，在36℃培养18-22小时（SN和FDA方法）。
3. 各取10ml上述悬浮液加到装有90mlEE肉汤(022160)/mLST-Vm(022212)的150mL的三角瓶中，在36℃/44℃增菌培养18-22小时。
4. 用划线或涂布法把混匀的肉汤接种到阪崎肠杆菌显色琼脂平板上，35-37℃培养18-24小时。
5. 可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验，对疑似阪崎肠杆菌菌落进行生化鉴定。
质量控制：
本品倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后36±1℃培养18-24小时生长情况如下表：
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质量控制
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质控菌株
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接种量
(cfu/平板) |
生长情况
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菌落色泽
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阪崎肠杆菌ATCC51329
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30 – 300
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良好
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绿-蓝绿色
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普通变型杆菌HK7132
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30 – 300
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良好
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灰黑色
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粘质沙雷伯氏菌HK7121
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5000
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不长
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－
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粪肠球菌ATCC29212
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5000
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不长
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－
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贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。
规 格：可配置1L的培养基干粉。
参考文献：
1.GB/T4789.40－2008 国家标准食品卫生微生物学检验阪崎肠杆菌检验
2.GB 4789.40－2010 国家标准食品安全国家标准食品卫生微生物学检验阪崎肠杆菌检验
3.SN/T 1632.1-2005 出入境检验检疫行业标准 奶粉中阪崎肠杆菌检验方法 第1部分 分离与计数方法
4. SN/T 1632.2-2005 出入境检验检疫行业标准 奶粉中阪崎肠杆菌检验方法 第2部分 PCR方法
5．ISO22964-2006 Milk and milk products-----Detection of Enterobacter sakazakii
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