广东环凯微生物科技有限公司

鉴定生化反应的12种试剂（表1）、10瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、10支一次性吸管。

开启西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在无菌条件下，按铝盖上的箭头方向打开铝盖，撕开铝盖，打开西林瓶胶塞（如左图）。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。

出血性大肠杆菌O157：H7为革兰氏阴性杆菌，需氧或兼性厌氧，有周鞭毛，并有菌毛，不产生芽孢的杆菌。发酵乳糖，不发酵或迟

缓发酵山梨醇；氧化酶阴性；MUG阴性。

从可疑肉汤培养物转接营养琼脂分离培养，将疑是肠杆菌科的新鲜菌苔置于已配备的无菌生理盐水中，与0.5 McFarland的浊度管比浊，将菌悬液制备成0.5McFarland ( 约10⁸cfu/mL )， 37℃培养18－24h，用吸管吸取2滴（约0.06mL）菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞，一般采用全加塞（如右图左两瓶所示），特殊情况在下表注明采用半加塞（如右图右两瓶所示），直立于内托的凹槽内（如右图），或放置于合适的瓶架中，于35－37℃培养箱中培养，结果观察见表1。注意：如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式，请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。

产品名称	结果判定		培养时间 （小时）	使用说明
	阳性	阴性
山梨醇	黄色	紫色	8－24
纤维二糖
棉子糖
蛋白胨水	红色	不变色	24	西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）培养后加靛基质试剂2－3滴，立即观察结果。
西蒙氏枸橼酸盐	生长	不生长	24－48	西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）用接种针挑取新鲜菌苔在斜面上划“之”字形接种，竖立培育。
鸟、赖氨酸脱羧酶	试验管蓝绿色， 对照管变黄	试验管与对照管均变黄	18－24	每株被检菌应同时接种氨基酸对照管一支，并加灭菌液体石蜡5-8滴覆盖培养基表面。培养18－24小时，未见阳性结果，继续培养4天，再做最终结果判定。
半固体琼脂	扩散生长	无扩散生长	24—48	用接种针挑取新鲜菌苔穿刺接种，竖立培育。
三糖铁琼脂	产酸变黄色， 产硫化氢变黑色	不变色	24	西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）用接种针挑取新鲜菌苔穿刺，穿刺完毕后在斜面上划“之”字形接种，竖立培育。
葡萄糖磷酸盐胨水	MR：     红色	不变色	96	西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）培养后加MR试剂2－3滴，立即观察结果。
	VP：     红色	不变色	48	西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）培养后依次加入8滴VP试剂甲液及4滴乙液，混匀，再培养10－20分钟观察结果。