广东环凯微生物科技有限公司

一）整套试剂及用品
鉴定生化反应的4种试剂（表1）、10瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、10支一次性吸管。

开启西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在无菌条件下，按铝盖上的箭头方向打开铝盖，撕开铝盖，打开西林瓶胶塞（如左图）。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。

大肠杆菌IMVC为从粪大肠菌群检测结果中进一步鉴别大肠杆菌和非大肠杆菌。

从产气EC肉汤管中接种伊红美蓝平板，35－37℃培养24h，从平板上挑取可疑菌苔接种于营养琼脂斜面, 35－37℃培养18-24h。从营养琼脂斜面上挑取菌苔置于已配备的无菌生理盐水中，与0.5 McFarland的浊度管比浊，将菌悬液制备成0.5McFarland ( 约10⁸cfu/mL )，用吸管吸取2滴（约0.06mL）菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞，一般采用全加塞（如右图左两瓶所示），特殊情况在下表注明采用半加塞（如右图右两瓶所示），直立于内托的凹槽内（如右图），或放置于合适的瓶架中，于35－37℃培养箱中培养，结果观察见表1。注意：如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式，请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。

表1 大肠杆菌和非大肠杆菌生化鉴别

产品名称	结果判定		培养时间 （小时）	使用说明
	阳性	阴性
蛋白胨水(色氨酸肉汤)	红色	不变色	24	西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）培养后加靛基质试剂2－3滴，立即观察结果。
葡萄糖磷酸盐胨水(MR-VP培养基)	MR：   红色	不变色	96	西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）培养后加MR试剂2－3滴，立即观察结果。
	VP：   红色	不变色	48	西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）培养后依次加入8滴VP试剂甲液及4滴乙液，混匀，再培养10－20分钟观察结果。
Koser氏枸橼酸盐	生长	不生长	24－48

                   备注：本鉴定盒是按照环凯产品目录中的品种成份从左到右的顺序摆放。