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一）整套试剂及用品
鉴定生化反应的25种试剂（表1）、5瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶5McFarland的浊度管、5支灭菌一次性吸管。
二）生化管的使用方法
开启西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在无菌条件下，按铝盖上的箭头方向打开铝盖，撕开铝盖，打开西林瓶胶塞（如左图）。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
三）耶毒假单胞菌酵米面亚种生化鉴定盒的详细使用方法
耶毒假单胞菌酵米面亚种是一种食物中毒菌，存在于发酵的玉米、糯玉米、黄米、高梁米、变质银耳以及周围环境中，它是
酵米面及变质银耳中毒的病原菌。本菌为革兰氏阴性小杆菌。
从纯培养的PDA 斜面上直接挑取少量菌苔或用0.85%无菌生理盐水稀释至5McFarland，用吸管吸取2滴的菌悬液加入每种微量西林瓶内。将已接种的西林瓶再套上胶塞，一般采用全加塞（如右图左两瓶所示），特殊情况在下表注明采用半加塞（如右图右两瓶所示），直立于内托的凹槽内（如图2），或放置于合适的瓶架中，于35－37℃培养箱中培养，结果观察见表1。
注意：如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式，请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
表1
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产品名称
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结果判定
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培养时间
（小时）
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使用说明
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阳性
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阴性
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葡萄糖、甘露醇、阿拉伯糖、木糖、半乳糖、卫茅醇、肌醇、侧金盏花醇
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黄色
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紫色
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18－24
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尿素
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桃红色
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淡橙红色
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12－24
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西蒙氏柠檬酸盐
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蓝色
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不变色
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24－48
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西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）用接种针挑取新鲜菌苔在斜面上划“之”字形接种，竖立培育。
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果糖
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黄色
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紫色
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8－24
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蛋白胨水
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红色
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不变色
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24
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西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）培养后加靛基质试剂2－3滴，立即观察结果。
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葡萄糖磷酸盐胨水（MR）
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红色
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不变色
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96
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西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）培养后加MR试剂2－3滴，立即观察结果。
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葡萄糖磷酸盐胨水（VP）
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红色
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不变色
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48
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西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）培养后依次加入8滴VP试剂甲液及4滴乙液，混匀，再培养10－20分钟观察结果。
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精氨酸脱羧酶
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试验管蓝绿色，
对照管变黄
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试验管与对照管均变黄
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18－24
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每株被检菌应同时接种氨基酸对照管一支，并加灭菌液体石蜡3－4滴覆盖培养基表面。培养18－24小时，未见阳性结果，继续培养4天，再做最终结果判定。
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紫牛乳
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黄色
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紫色
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8－24
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续表
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产品名称
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结果判定
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培养时间
（小时）
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使用说明
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阳性
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阴性
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明胶
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4℃液化
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4℃固态
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48－72
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用接种针挑取新鲜菌苔穿刺，培养后置4℃冰箱10分钟后观察结果。
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硫化氢
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黑色
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无黑色
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6－24
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用接种针挑取新鲜菌苔穿刺，竖立培育。
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硝酸盐（还原）
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深红色
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略带
淡粉红色
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18－24
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西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）培养后加硝酸盐还原试剂甲、乙液各2滴，混匀，立即观察结果。
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OF
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24－48
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被检菌同时接种两支生化管，其中一支加灭菌液体石蜡3～4滴覆盖表面。两支管均为黄色判断为发酵型细菌；加石蜡管不变黄，而未加石蜡管变黄为氧化型细菌；两支管均不变黄为产碱型细菌。
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氧化酶试纸
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红色
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不变色
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立即
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用玻棒挑取新鲜培养物于试纸表面，观察菌落颜色。
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备注：本鉴定盒是按照环凯产品目录中的品种成份从左到右的顺序摆放。
三）椰毒假单胞菌酵米面亚种生理生化性状。见表2。
表2 椰毒假单胞菌酵米面亚种生理生化性状
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阳性
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阴性
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动力 尿素
OF试验（O型） 明胶液化
葡萄糖 卵磷脂酶
果糖 侧金盏花醇
木糖 西蒙氏柠檬酸盐
半乳糖 精氨酸脱羧酶
阿拉伯糖 紫牛乳
甘露醇 37℃生长
肌醇 卫茅醇
硝酸盐(还原)
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氧化酶
靛基质
V-P
MR
硫化氢
5℃不生长
41℃不生长
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